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미생물이야기 세균검체의 종류
2013-08-07 14:05:20
이엠생명과학연구원

세균검체의 종류

1.배지란 무엇인가

배지란 적당량의 영양성분을 혼합해서 미생물을 생존시키고 지속적으로 증식시키기 위해서 인공적인 증식환경이 만들어진 상태를 말하는데 이들 배지는 사용목적, 배지의 성분, 배지의 물리적 성상에 따라 몇 가지로 나눌 수 있다.

 

2.배지의 재료

배지중의 필요성분은 세균의 종류에 따라 다르다. 공통적인 것은 탄소원, 질소원 각종 광물질, 물이며, 여기에 지적 pH, 산화환원 전위, 각종 발육인자 등이 추가된다. 미생물배양에 이용되는 영양물질은 다음과 같다.

 

(1) 육즙, 육즙추출액(Meat infusion, Meat extract)

쇠고기의 근육부분에서 수용성 침출물을 추출해서 농축시킨 것으로 육수 또는 육즙이라고도 하며 냉동진공 건조방법에 의해 분말로 만든 것으로 염류, 발육소, 핵산성분, 기타 당분, 아미노산, 비응고성 단백을 제공한다. 혐기성균의 배지에는 환원물질이 많이 들어있는 간, 뇌, 신장의 추출물이 많이 이용된다. 배지중의 주성분으로 이용되며 포도당,glycogen 등을 함유하므로 당분해 시험용 배지로는 쓰이지 않는다.

 

(2) 펩톤 (peptone)

카제인(casein), 동물의 육류 등의 단백질을 pepsin 또는 trypsin, pancreatin 등의 효소로 소화시켜서 미량의 proteose를 함유한 작은 분자의 황색분말로서 수용상태에서는 황갈색의 약한 산성을 나타낸다. 펩톤은 단백질의 종류와 소화 방법에 따라 구성성분에 차이가 있다. Casein의 효소 분해물인 tryticase, casitone, tryptone 등은 tryptophane을 많이 함유한다. 이들은 특히 세균대사에 필요한 탄소원 및 질소원을 제공한다. 황화수소 생성시험, indole 생성시험에서는 tryptophane이 많이 함유된 tryptophaned을 사용한다.

 

(3)효모추출액(Yeast extract)

효모에서 추출한 수용성 침출물질로써 담황색 분말이다. 염류, 발육소, 핵산성분, 당분, 아미노산, 비응고성 단백 등을 세균대사에 제공한다. 효모를 자가 융해시켜 만든 추출물에는 각종 비타민이 풍부히 있으며, 이 밖에 mineral, 아미노산 등이 풍부하여 배지제조시 첨가하여 사용한다. Yeast extract는 식빵효모나 맥주 효모를 자가 융해시켜 만든 것이다.

 

(4) 물

배지를 만들 때 증류수나 이온 교환수 등의 순수한 물을 쓴다. 수돗물이나 우물물은 각종 유기물질이 함유되어 있어서 높은 재현성을 필요로 하는 실험용에는 적합하지않다.

 

(5) 한천(Agar)

해초류, 조류 등에서 추출한 함수탄소의 일종인 다당류(polysaccharide)이다. 녹는 온도는 100℃이고 1.5~2.0%의 용액은 43~45℃에서 응고되어 탄력성있는 고체가 된다. 일단 고형화되어 굳은 한천은 다시 100℃로 끓여야만 녹는다. 고형화된 배지를 한천배지(agar medium)라고 한다. 배지에 첨가되는 한천의 농도는 평판배지용으로는 1.5% 들어있으며 운동성 시험시 이용되는 반고형배지에는 0.3%가 들어있다.

 

3. 배지의 종류

(1) 물리적 성상으로 구분한 종류

ㄱ.액체배지 : peptone, beef extract 등이 들어이TSms 육즙은 세균의 성상검사, 증식, 대사산물 측정을 하기 위해 이용된다. 또한 미생물의 생리, 화학적 연구나 미생물의 대량 배양에 이용된다.

ㄴ.고형배지 : 액체배지에 agar, 젤라틴, 실리카겔 등을 첨가하여 굳힌 것으로 고체배지는 미생물의 보존 배양, 순수 분리 등에 사용된다. 고체배지는 평판배지, 고층배치, 사면배지 등이 있으며 목적에 따라 사용 방법이 다르다. agar 등의 고형제의 함량은 사용목적에 따라 바뀐다.

 

(2) 화학적 성상으로 구분한 종류

ㄱ.천연배지 : 배지 재료가 천연물로서 그 화학 조성이 확실히 알려져 있지 않은 배지를 말한다. 미생물의 정확한 생육소를 모를 때, 생육소의 요구량이 많을 때 사용한다. 감자한천, Oat meal 배지, 볏짚 배지, Nutrient broth 배지 등이 있다. 실험실에서 쓸일을 거의 없다.

ㄴ.합성배지 : 성분이 화학적으로 확실한 물질만으로 된 배지로서 세균의 생화학적 성상 검사, 균체 성분, 대사 연구에 쓰인다.

 

(3) 사용목적에 따른 종류

ㄱ.보통배지 : 보통배지는 될 수 있는 한 많은 미생물이 생육 할 수 있도록 제조된 배지로 세균용으로는 Nutrient broth, Nutrient agar를 곰팡이용으로는 감자한천 배지 등이 이용된다.

ㄴ.특수배지 : 특수배지는 선택배지, 판별배지, 증식배지 ,생화학적 실험용 배지 등이 있다.




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