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미생물이야기 호기성세균에 대해 알아보자.
2013-08-13 15:05:36
이엠생명과학연구원

호기성 세균

 

   토양 중에는 다종다양한 세균이 존재하고 있다. 이들 세균의 영양요구성은 다양하여 토양 중에 존재하는 세균 전부를 하나의 배지에 생육시킨다는 것은 거의 불가능하다. 그러나 일정한 배지 중에 토양 중의 세균의 일정부분을 생육하여 군락을 형성시켜 두 종류 이상의 시료 내의 세균수를 비교한다는 것은 중요한 의미를 갖는다.

토양 중의 전 세균수를 측정하는 방법으로 사용되는 것은 희석평판법에 의한 호기성세균의 측정법, 그람음성균에 의한 crystal violet 내성세균수의 측정법 및 내열성세균의 측정법 등이 있다.

 

1. 호기성 세균의 측정법

희석평판법에 의한 egg - albumin 한천배지 및 토양침출액의 한천배지를 일반적으로 사용한다.

2. crystal violet 내성세균의 측정

세균의 그람염색성의 차이는 단순히 일반미생물학 입장뿐만 아니라 생태적인 면, 특히 영양과 수분조건에 관여하는 의의 등을 알 수 있다.

측정 방법으로는 선택적으로 생육케 하는 배지를 사용하는 것으로, 그람양성인 세균이 음성인 세균에 비하여 염기성염색 특히 아크릴프로핀 계의 염색에 의해 사멸이 되는 것을 이용하는 것으로 crystal violet을 사용하는 것이다.

Egg - albumin 한천배지 또는 토양침출액 한천배지를 사용하는 것으로 배지 1ℓ당 0.1% crystal violet용액 5㎖를 가하여 autoclave 멸균한 뒤에 사용한다.

3. 내열성세균수의 측정

토양 중의 세균포자가 영양세포에 비하여 내열성이 있는 것을 이용하여 토양을 열처리하여 영양포자를 사멸시킨 후 포자를 생육시켜 측정하는 것이다.

조제된 토양희석용액(10-4∼10-5) 일정량을 시험관에 취한 후 80℃의 water bath에 10분간 넣어둔 후 그 희석액을 희석평판법에 준하여 세균수를 측정한다.

4. 호기성 세균의 분리와 보전

생균수 측정에 사용된 평판 중 각각 고립된 colony가 100개 정도 생긴 것을 고른 후 무균상자에서 백금이를 사용하여 평판 아래에서부터 분리, 적당한 고체 사면배지에 이식한 후 25∼28℃에서 배양한다. 사면배양된 세균 1백금이를 살균수에 넣은 후 진탕한다. 이 세균 현탁액을 이용하여 생균수 측정에 준하여 30∼50개의 고립된 colony를 형성시킨다.

이러한 방법에 의하여 생긴 콜로니를 상기의 방법으로 2∼3회 반복한 뒤 순수분리한다.

 




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