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미생물이야기 사상균을 평면배양 및 사면배양할 경우 다음과 같은 점을 관찰한다.
2013-08-13 15:17:17
이엠생명과학연구원

형태의 관찰

사상균의 형태는 배양기의 종류, 배양조건에 따라서 변화하기 때문에 여러 가지 배양기에 배양하여 비교검사하지 않으면 안된다. 사상균을 평면배양 및 사면배양할 경우 다음과 같은 점을 관찰한다.

① 균의 색상(청, 녹, 황, 적, 백 등)

② 기균사 발달의 유무

③ 분생포자 양생의 대소 및 그 색조

④ 색소 생성의 유무(배지 중 혹은 기균사에 생산될 경우의 색)

사상균의 동정 및 검사에는 형태적 특성, 예를 들면 유성, 무성 증식기관의 형태가 기준이 되므로 사상균의 현미경관찰에 있어서는 이것들을 중점적으로 잘 관찰한다. 보통 관찰은 다음과 같이 행한다. 즉 사면배양 혹은 평면배양의 군락에 백금이로 사상균의 구조를 될 수 있으면 파손하지 않도록 주의하면서 slide glass에 취하고 멸균증류수를 떨어뜨려 cover glass를 놓고 관찰한다. 이 방법으로는 가끔 수분의 증발이 일어나 균사에서 포자가 분리되든가 균사구조가 변형되므로 이것을 방지하기 위하여 lacto phenol 고정제를 사용한다. 사상균의 생육 상태를 그대로 검사할 경우는 slide culture 혹은 습실배양을 행한다.

 

 

1. Slide culture

slide glass, cover glass및 직경 약 2mm의 철사를 일변 1.8cm의 U자형으로 구부려서 Petri dish에 넣고 무균적으로 사상균의 분생아포를 접종하여 잘 교반한다. 살균한 피펫으로 소량을 취하고 slide glass 상의 철사의 U자내에 부어 cover glass로 덮는다. 이 경우 아래의 그림과 같이 cover glass의 세변을 파라핀으로 철사와 같이 slide glass에 고정시킨다. 이와 같이 한 slide glass를 소량의 살균수를 여지에 첨가하여 넣은 petri dish내에 뚜껑을 하여 30℃로 배양한다.

때때로 내놓고 규사의 발육사태 및 분생포자의 발아모양을 검경한다.

2. 습실배양

살균한 유리고리(직경 1cm, 높이 6mm)를 파라핀 혹은 젤라틴으로 슬라이드 글라스에 고정한다. 직경 1cm의 glass환을 건열살균하고 슬라이드글라스 위에다 그림과 같이 파라핀으로 고정시키고 이 작은 실내에 소량의 파라핀을 넣고 고리의 위 가장자리에는 와세린을 칠하여 둔다. 액체배양기에 분생포자를 이식하고 충분히 혼합한 후에 그 한 방울을 cover glass 위에 떨어뜨리고 이를 뒤집어 고리에 얹는다. 전체는 Petri dish에 넣고 배양하여 가끔 꺼내어 slide culture와 같이 관찰한다. cover glass에 적합한 액체 배양기 한 방울 중에 1∼5개의 분생아포가 포함될 정도가 가장 알맞다.




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