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미생물이야기 사상균의 생장량은 균사의 신장도 혹은 균체의 건조중량의 측정에 의하여 행해진다.
2013-08-13 16:05:35
이엠생명과학연구원

생리적 시험법

 

 

1. 사상균의 생육적 측정

사상균의 생장량은 균사의 신장도 혹은 균체의 건조중량의 측정에 의하여 행해진다. 균사의 신장도 측정에는 그림과 같은 여러 가지 생장관이 사용된다. 먼저 건열살균한 생장관에 가열용융한 한천배양기에 부어 그림과 같이 굳게 한다. 사상균의 분생아포 혹은 균사의 소편을 관의 한 쪽에 접종하여 배양한다. 시간이 지남에 따라 균사는 관의 다른 쪽으로 생육신장하므로 일정 시간마다 그의 선단에 표시하여 한 시간에 신장하는 길이를 측정한다. 생장관에는 목적에 따라서 여러 가지 형태가 있다. (a)는 만들기가 용이하고 (b)는 적당한 시기에 균사를 꺼낼 수 있으며 (c)에서는 한쪽을 닫고 있기 때문에 다수 멸균이 될 수 있다는 점이 잇점이다.

2. 생육, 온도 및 pH

건열멸균(건열멸균)한 300㎖ 삼각플라스크에 Czapek액 혹은 맥아즙 100㎖를 넣고 살균 후 사상균의 포자를 백금이로 일정량 접종하여 15∼50℃의 각 온도로 배양한다. 일정 기간 배양한 후 균합을 여지에 꺼내어 충분히 씻은 후 몇 장의 여지로 눌러 가능한 수분을 제거한다. 항온건조기(105℃)중에서 항온이 될 때까지 건조시켜 균체의 건조중량을 측정하여 사상균의 생육최적온도, 생육한계온도를 결정한다. 또 앞에서 기술한 액체배양액에 산 또는 알칼리를 가하여 pH 2.0∼10.0 의 각 pH로 조절하여 살균한 후, 곰팡이을 접종하여 30℃ 항온기에서 일정시간 배양한다. 먼저와 같이 생육균체의 건조중략을 구하고 최적 pH를 조사한다.

3. 생육과 탄소, 질소원

Czapek액, Pfeffer액과 같은 합성배양기에 탄소원과 질소원을 첨가하여 곰팡이를 배양하여 번식의 여부를 균체중량에서 비교한다. 예를 들면 탄소원으로서 각종의 단당류, 다당류 그리고 질소원으로서 여러 가지 질산염, amino산, peptone 등을 사용한다.




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