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미생물이야기 세균의 성장곡선과 세균수의 측정
2013-08-16 10:09:27
이엠생명과학연구원

 

세균의 성장곡선과 세균수의 측정

세균의 성장곡선과 세균수의 측정  


(1) 온도를 달리하고 일정한 시간 간격을 두고 균액의 흡광도를 측정해 선장곡선을 작 성할 수 있다
(2) 미생물의 성장과 생존은 물리적 화학적 환경요인에 의해 상당한 영향을 받는다.
물리적 요인으로는 온도, pH, 삼투압 등이 있다.


* 온도에 따른 균의 종류


① 저온균(psychrophile) : 5℃ ∼ 20℃ 정도에서 최적성장
② 중온균(mesophile) : 37℃정도가 최적온도
③ 고온균(thermophile) : 45℃ ∼50℃ 정도에서 최적성장
(3) 탁도측정법 (turbidimetry determination)
조사해야 할 표본가 많은 경우에는 세균의 농도가 증가함에 따라 탁도(흡광도)가 비례하여 증가하는 것을 이용해 대강의 세균수를 측정하는 방법


[2] Cell counting

(1) 세균수 측정


① 생균수 측정 : 균의 증식 능력에 근거하여 배지상에 형성된 집락의 수를 산정하여 측정
② 총균수 측정 : 일정부피내에 존재하는 세균수를 혈구계수기 등을 이용하여 현미경 시야에서 직접 세균수를 세는 방법
③ 액체 배지에서 탇도(turbidity) 측정
④ 건물량(dry weight) 측정


(2) 생균수 측정(평판 계수법, Plate count technique) : 가장 보편적인 방법으로 살아있 는 세균은 집락을 형성한다는 것을 전제로 한다.


* 생균수 측정법(Viable count) : 평판배지상에 형성된 집락의 수는 실내에 포함되어 있는 집락 형성이 가능한 살아있는 세균의 숫자로 봄


방법


[1] 세균의 성장곡선 작성
(1) 2개의 erlenmeyer flask에 액체 배지를 30ml 씩 제조하여 고압증기멸균한다.
(2) Bacteriodes SY-60균을 이식한 직 후 600nm에서 흡광도를 측정한다.
(3) 37℃, 4℃ 양쪽온도에서 유지하면서 30분마다 turbidity를 측정한다.
(4) 5회이상 측정 후 성장곡선을 작성한다.


[2] Cell counting


(1) test tube 6개에 액체 배지 4.5ml씩 만들어 멸균한다.
(2) 8개의 petri dish에 고체 배지를 만든다.
(3) mouse 분변을 하나의 test tube에 넣고 완전히 용해시킨다.
(4) 0.5ml을 취하여 다른 test tube에 넣고 잘 혼합한다.
(5) 같은 방법으로 0.5ml를 취하여 다른 test tube에 넣고 잘 혼합한다.
(6) 3회 더 반복하여 혼합희석한다.
(7) 102,103,104,105 배 희석한 각각의 test tube에서 0.1ml∼0.2ml씩 정확히 취하여 백금이 로 고체배지에 도말한 후 하루정도 incubator에 배양한다.




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