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미생물이야기 장염비브라오균으로 확인된 분리주에 대하여 균체 항원이나 협막항원을 이용해 O 혈청형이나 K 혈청형을 추가로 분류할 수도 있다.
2013-08-16 16:50:08
이엠생명과학연구원
개요
 
 

1) 형태학적 특징
0.5~0.8 × 1.4~2.6 ㎛의 그람음성 간균으로, 한 개의 편모가 있어서 운동성이 활발하며 아포는 없으나 협막은 있다. pH 6.4~9.6, 16~42℃의 범위에서 생장이 가능하며 최적온도는 37℃이다.

2) 생화학적 특징
당 분해능은 일정치 않으며, Mannose를 분해하나 sucrose는 대부분 분해하지 못하며, oxidase 양성, indole 생산 양성이며, 생장을 위해 1~3% 농도의 NaCl 이 요구된다.

3) 면역학적 특징
13군의 균체항원 (O항원)과 74종의 협막항원 (K항원)으로 분류 가능하다. 편모항원 (H항원)은 공통이다.

 

장염비브리오균(Vibrio parahemolyticus)은 다른 Vibrio속 균들과 마찬가지로 호염성(halophilic) 세균으로 연안이나 강 하구에 많이 존재한다. 따라서 장염비브리오 식중독은 연안이나 강 하구에서 서식하는 해산물을 섭취하고 발생하는 경우가 대부분이며 굴, 조개 등과 같은 패류, 게, 새우 및 연안에 서식하는 각종 어류가 특히 문제된다. 최근에는 동남아를 중심으로 한 V. parahemolyticus O3:K6 혈청형의 범유행이 문제가 되고 있다.
Vibrio속 균들은 18 ~ 37℃의 환경에서 증식한다. 여름이 되어 해수(sea water)의 온도가 상승하면 Vibrio 속 균들이 본격적으로 증식하며 이에 따라서 늦여름과 가을에 해양 생태계 내에서 이들 균들의 밀도가 가장 높다. 국내에서 콜레라, 비브리오 패혈증, 장염비브리오 식중독 등 Vibrio속에 속하는 균에 의한 질환이 늦여름과 가을에 집중되는 것은 이러한 생태학적 특성으로 인한 것이다.

 
 임상적 특성
 
 

병원성 V. parahemolyticus는 TDH(thermostable direct hemolysin)이라는 장독소(enterotoxin)를 생성하는데 이는 장관 상피에서 염소 이온과 수분의 분비를 촉진하며, 이로 인해 상당수의 장염비브리오 식중독 환자들은 많은 양의 수양성 설사(watery diarrhea)를 호소하게 된다.
감별 진단을 위해 꼭 기억해야 할 임상적 특성은 다음과 같다. 첫째, 늦여름이나 가을에 주로 발생하며 둘째, 해산물 섭취와 관련이 있으며 셋째, 2 ~ 48시간 정도의 잠복기를 가지며 넷째, 상당수의 환자에서 다량의 수양성 설사를 호소하며 다섯째, 미열이 동반될 수 있지만 고열을 보이는 경우는 드물다는 것 등이다. 비슷한 임상적 특징을 보일 수 있는 질환으로는 장독성 대장균(enterotoxigenic Escherichia coli)증이 대표적이다.

 

 
 진단방법
 
 

실험실 진단기준
1) 검체의 종류
대변 및 직장채변 검체.

2) 검체 채취방법 및 보관
검체는 발병 후 24시간 이내, 항균제 사용 이전에 채취하는 것이 좋다. 장시간 운송이 필요할 때에는 수송용 배지에, 수 시간 내에 실험이 가능할 때는 APW나 TCBS 한천배지에 접종한다.

3) 검사방법
○ 증균 및 선택배양
증균 배양은 검체 채취 후 바로 APW (pH 8.4±0.2)에 접종하여 37℃에 서 6-8시간 정치 배양한 후 TCBS배지에 접종하여 35~37℃, 18~24시 간 배양한다. 만약 배양시간의 준수가 어렵다면 하룻밤 배양된 APW로부터 한 루프(loop) 정도를 떼어내어 새로운 APW에 접종한 후 6-8시간 정치 배양한 다음 TCBS배지에 접종한다. 임상증상이 뚜렷한 환자의 검체는 증균과정없이 바로 TCBS배지에 접종할 수 있다. 전형적인 장염비브리오균일 경우 TCBS배지상에서 sucrose를 분해하지 못하므로 녹색 집락을 형성하게 된다.

○ 분리 및 동정
TCBS 배지에서 전형적인 양상을 보이는 독립된 집락의 가운데 부분을 루프 (loop)나 니들 (needle)로 가볍게 떼어내서 NaCl 농도를 1%로 맞춘 비선택배지 (TSA, HIA 등)에 접종한다. 비선택배지에서 자란 독립된 집락을 선택하여 순수 분리되었음을 확인한 후, 미생물동정용 키트 등을 이용하여 생화학적으로 동정한다. TCBS배지에서 자란 집락은 생화학 동정에 이용하지 않는다.

○ 혈청형 확인
장염비브라오균으로 확인된 분리주에 대하여 균체 항원이나 협막항원을 이용해 O 혈청형이나 K 혈청형을 추가로 분류할 수도 있다.

○ 독소 유전자 확인
확인 진단 및 병원성 확인을 위하여 중합효소 연쇄반응을 이용하여 장염 비브리오균에 특이적인 이열성 용혈독소 (thermolabile direct haemolysin)를 암호화하는 tlh 유전자와 장염 비브리오균의 병원성에 영향을 미치는 내열성 용혈독소 (themostable direct haemolysin)를 암호화 하는 tdh 유전자의 존재를 확인하기도 한다.

4) 판정 생화학 동정결과
Vibrio parahaemolyticus이면, 지정전염병에 속하는 병원체로 판정할 수 있다. 추가로 혈청형을 확인하여 분류한다.  




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