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효소enzyme 간기능 검사(Liver function test, LFT)에 대하여..
2013-08-23 10:16:10
이엠생명과학연구원
간기능 검사(Liver function test, LFT)
 
1. 간의 구조
* 인체에서 가장 큰 선(gland)으로서 약 1000-1500g으로 생체내 최대의 장기.
* 횡경막 바로 아래 위치, 좌우 상복부에 위치, 정상 상태에서는 만져지지 않는다.
 
2. 간의 기능
1) 대사기능 (영양소)-- 단백질, 당질, 지질
2) 배설기능- 담즙의 생성과 배설
3) 해독기능 -- 유해물질, 각종화합물의 산화, 환원, 수해, 결합등
4) 혈액응고, 섬유소용해 인자의 생성
5) 순환조절기능 : 신장과 함께 체액의 항상성 유지에 중요한 역할
6) Hb형성, 파괴, 철분대사
 
3. 간기능검
1). LFT Panel
Bilirubin(Total, Direct), Total protein, Albumin, AST, ALT, ALP, r-GT, Cholesterol
2). Enzyme 활성 검사
* 간세포 장애를 반영하는 효소
①. AST (Aspartate aminotransferase) ②. ALT (Alanine aminotransferase)
③. LDH or LD (Lactate dehydrogenase) ④. ICD (Isocitrate dehydrogenase)
* 담도 폐쇄를 반영하는 효소(일탈, 간, 담도계 효소)
①. ALP ②. LAP ③. r-GT (r-Glutamyltransferase)
* 간의 효소 생성능을 반영하는 효소
①. CHE (Cholinesterase) ②. LCAT (Lecithin-cholesterol acyltransferase)
3). 해독기능
①. 마뇨산 시험 ②. 약물대사 시험
4). 이물질 배설 기능
①. B.S.P ②. I.C.G
 
4. Jaundice(황달)
혈액내의 담즙색소가 너무 많아지면 그 색소가 조직내로 침투하여 노란색을 띄는 현상
* 황달의 감별
용혈성
간세포성
폐쇄성
Serum direct Bilirubin
Normal
증가(+)
증가(++)
Serum indirect Bilirubin
증가(++)
증가(++)
-
Urine Bilirubin
-
증가(+)
증가(++)
Urine Urobilinogen
증가(++)
증가(+)
-
Stool color
dark
early pale, late dark
pale
 
5. Bilirubin
* 햄단백(헤모글로빈, 마이오그로빈, 싸이토크롬C, 등)에서 유래한다.
광선(특히 자외선)에 의해 쉽게 분해(1시간 노출 50% 감소)
대사 환원 간
Hb → Heme → biliverdin ----→ bilirubin+albuminbilirubin+glucuronic acid
indirect Bil direct bil.
1) 측정법
A. Diazo 법 (Vanden- Bergh 반응)
1. Malloy - Evelyn법 : pH 1.2
* Hemolysis 영향이 크다, 여러 가지 변법은 pH 차이에 의한 것
1). Total Bilirubin 560nm
원리 : serum + methanol + Diazo 시약 . D.W ---- Azobilirubin(적자색)
Diazo 시약 Diazo(a) : Sulfanilic acid 1g / HCL 15ml/l
(pH 2.7) Diazo(b) : Sod. nitrite 0.5g/l D.W
2). Direct Bilirubin (diazo 반응)
원리 : serum + Diazo 시약 . D.W ------- Azobilirubin(적자색)
3). Indirect Bilirubin
Total Bil. - Direct Bil.=
2. Jendrassik-Grouf 법 pH 6.5에서 시행, 흡광도 측정 pH 13.0
1) Total Bilirubin
원리 : serum + Caffeine + Diazo시약+Fehling II시약-Azobilirubin(청자색)
Sod. Benzoate
2) Direct Bilirubin 600nm
원리 : serum + Diazo 시약. D.W + Fehling II 시약 - Azobilirubin(blue)
3. Jendrassik-Grouf법의 Michaelsson 변법
Diazo 반응 촉진제로 Fehling II 시약은 Dyphylline로 사용
B. 효소법
C. HPLC : 포합형, 비포합형의 Bilirubin 정확한 측정이 가능
D. 황달지수(Icterus index) : 표준액 0.01% 중그롬산 칼륨
참고치 : Total Bil : 0.3-1.2mg/dl, Direct Bil : 0-0.4mg/dl
 
6. 혈청 교질 반응
1) 혈청교질반응이란
① serum에 시약을 가하여 혼탁이나 침전의 생성 상태를 측정한다.
② 주로 albumin의 감소, 침전 인자인 β-, γ-globulin의 증가를 보임.
③ 비특이적 반응(만성 감염증, 교원병, 다클론성 면역 글로브린 혈증)에서 증가
2) 종류
A. 혼탁도 검사(turbidity test)
가). T.T.T(Thymol turbidity test) -- shank-Hoagland법
원리: Thymol을 포화 용해시킨 Barbital buffer(PH 7.55 ± 0.05)에 일정량의 serum 을 첨가하면 침전을 일으킨다. 25°C에서 30분간 유지 -- 660nm에서 reading.
특징 : β-, γ-globulin이 반응하여 탁도 생성.
표준액 -- BaSO4(황산바륨) 사용
급성간염, 간경변, Virus성 간염 -- 강 양성 반응
나). Z.T.T.(Zinc-sulfate turbidity test) -- Kunkel법
원리 : ZnSO4 buffer + serum(γ-globulin) ⇒ Zn-γ-globulin
특징 : buffer pH 7.55 ± 0.05
γ-globulin이 반응하여 탁도 생성.
만성간염, 간경변 -- 양성 반응
B. Precipitation test
가). C.C.F.(Cephalin cholesterol flocculation test)
원리 : Cephalin cholesterol유탁액 + γ-globulin ⇒ 침전
특징 : γ-globulin이 반응하여 탁도 생성.
바이러스성간염, 간세포성 질환, cirrhosis, necrosis -- 양성 반응
 
7. 이물질 배설 기능 검사(간의 배설 기능 검사)
* 간 기능 검사로 가장 예민한 방법이다.
* 적절한 색소를 주입하여 간의 해독 작용을 보는 방법이다.
* 건강한 간 -- 색소를 신속하게 제거
손상된 간 -- 간 기능 저하로 장시간 혈중에 색소가 남게 된다.
*이용되는 색소 : Azorubin S, Indocyanine green, Bromsulfophthalein, Rose bengal
 
1) B.S.P(Bromsulfophthalein)
* 산에서는 무색, 알칼리에서는 적자색을 나타내는 인체에 무해한 색소.
* 피검자에게 anaphylactic shock, 혈관통, 오심, 구토, 현기증 부작용 -- 곧 회복
* 간손상의 예민한 검색과 정도를 숫자로 표시할 수 있다.
* serum bilirubin이 4mg/dl이상 올라간 경우 의미 없다.
원리 : 간의 색소 배설 능력
BSP정맥주사--간세포의 색소 배설 기능으로 70-80%는 신속히 담즙중으로 배설--urine.
간장애시 혈중에 정체, 이 정체율을 %로 나타낸다.
검사법 : 체중 kg당 5mg 주사법(정맥주사)--45분후 반대쪽에서 혈액 체취
참고범위 : 0 - 5 %, (5-15% 경도, 15%이상- 중도) 황달, 용혈의 영향
임상적 의의 : 담도폐쇄, 간성질환시 저류량 증가, 진행된 간 경화증 40-50%
BSP dye : pH 8.3 무색, pH 10.0 적자색, 발색제는 0.1N NaOH
2) I.C.G(Indocyanine green test)
인체에 무해한 암녹색의 색소로 정맥 주사시 Albumin과 신속히 결합하여 90% 이상에 간세포에 포합되지 않고 담즙중으로 신속하게 배설 -- 소변으로 거의 배설되지 않고 대변으로 배설. BSP보다 안전하다. shock 및 용혈이나 황달의 영향이 거의 없다.



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